

北方伟业计量集团有限公司
培养基: | 酵母膏:5.0g,蛋白胨:10.0g,NaCl:10.0g,pH:7.0(25℃) | ||
使用方法: | 1.溶解: 收到质粒干粉后,请加入 20μl 无菌水至管底,溶解质粒,室温静置 1min; 2.混合(吸附质粒): 200μl 感受态细胞 + 质粒 DNA 5~10µl 混匀,冰上放置 30min; 3.热激导入: 42℃静置 90s; 4.收缩膜孔: 冰浴 2min; 5.修复培养: 毎管加 800µl LB 液体培养基,37 ℃培养 1h 150 r/min; 6.筛选培养: 将适当体积(100 µl)的复苏细胞,涂布在相应抗性的 LB 平板上,正置平皿 30min(琼脂面务必干燥后), 倒置培养 12-16h,出现菌落。 7.提取: 挑取单克隆菌落至相应抗性 LB 液体培养基中,震荡培养 12-16h,根据试验需要提取质粒。 | ||
生长条件: | LB +氨苄青霉素,37℃(克隆菌株DH5α,6849bp ,启动子:LEU2,T7,T3 复制子:2U ) | ||
存储条件: | 2-8℃ | ||
安全等级: | 0 | ||
参考用途: | 酵母表达载体 |